مقايسة تكملة الإسفار ثنائي الجزيء (BiFC) هي طريقة تستخدم لتصور تفاعل البروتين والبروتين مباشرة في الجسم الحي باستخدامتصوير الخلية الحية أو الخلايا الثابتة. … تم وصف BiFC لأول مرة بواسطة Hu et al.
كيف يعمل تكملة الفلورة ثنائية الجزيئات؟
يعتمد مبدأ عمل BiFC على تطوير المركب الفلوري ، نتيجة ارتباط جزأين من البروتين الفلوري عندما يكونان على مقربة بسبب تفاعل البروتين والبروتين في الأجزاء ، أي ، في BiFC ، ينقسم الفلوروفور إلى نهايات نهائية للأمينات والكربوكسيل.
ما هو اختبار BiFC؟
اختبار تكميل التألق ثنائي الجزيئات (BiFC) يتيح التصور البسيط والمباشر لتفاعلات البروتين في الخلايا الحية(45).يعتمد نهج BiFC على تكوين مجمع الفلوريسنت عندما يتفاعل بروتينان مندمجان في أجزاء غير فلورية من بروتين الفلورسنت مع بعضهما البعض (الشكل
لماذا يتم اختبار BiFC؟
فكرة BiFC هي للتعبير عن نصفي GFP مدمجًا في البروتينات التي تهمكإذا تفاعلت نقاط الاهتمام ، فيمكنك جمع كلا النصفين معًا للحصول على GFP وظيفي. لذلك إذا كان هناك نصف GFP معبرًا عنه في الخلية ، فلست مندهشًا من أن جسمًا مضادًا لـ GFP يمكنه اكتشافه.
هل BiFC قابل للعكس؟
تم توثيق عدم إمكانية الرجوع في مجمعات BiFC جيدًا (10) ، وسيظهر أن معظم ، إن لم يكن كل ، بروتين الفلورسنت أنظمة BiFC القائمة على أساس لا رجوع فيها(8 ، 33 ، 43 ، 48-51).