إرشادات لإذابة الخلايا
- قم بإذابة الخلايا المجمدة بسرعة (< دقيقة واحدة) في حمام مائي 37 درجة مئوية.
- قم بتخفيف الخلايا المذابة ببطء قبل احتضانها ، باستخدام وسط نمو مُسخن مسبقًا.
- خلايا مذابة اللوحة بكثافة عالية لتحسين الاسترداد.
- استخدم دائمًا تقنية التعقيم المناسبة واعمل في غطاء التدفق الصفحي.
لماذا يتم إذابة الخلايا؟
من الضروري إذابة الخلايا بشكل صحيح من أجل الحفاظ على جدوى الثقافةوتمكين الثقافة من التعافي بسرعة أكبر. بعض المواد الواقية من التجمد ، مثل DMSO ، سامة فوق 4 درجات مئوية. لذلك ، من الضروري إذابة الثقافات بسرعة وتخفيفها في وسط المزرعة لتقليل التأثيرات السامة.
ما هي عملية الذوبان؟
الذوبان هو عملية لأخذ منتج مجمد من المجمد إلى درجة حرارة (عادة أعلى من 0 درجة مئوية) حيث لا يوجد ثلج متبقي، أي "إزالة الجليد". غالبًا ما يعتبر الذوبان مجرد عكس لعملية التجميد.
ما هي أفضل طريقة لتجميد الخلايا؟
قم بتجميد الخلايا ببطء عن طريق تقليل درجة الحرارة عند حوالي 1 درجة مئوية في الدقيقة باستخدام ثلاجة التجميد أو حاوية التجميد بالتبريد مثل “Mr. Frosty ، متوفر من أدوات مختبر Thermo Scientific Nalgene (Nalge Nunc). استخدم دائمًا وسيط التجميد الموصى به.
كيف تذيب خلية أساسية؟
امسح الجزء الخارجي من قارورة الخلايا التي تحتوي على 70 ٪ من الإيثانول أو الأيزوبروبانول. في خزانة السلامة الأحيائية ، لف الغطاء ربع دورة لتخفيف الضغط الداخلي ثم أعد إحكامه. قم بإذابة الخلايا بسرعة في حمام مائي 37 درجة مئويةعن طريق تحريك القارورة برفق.قم بإزالة القارورة عندما تتبقى كمية صغيرة من الثلج.
